Ученые из Сиднейского университета (Австралия) создали лабораторную платформу тестирования для классификации VUS в органоидах сетчатки — небольших трехмерных структурах клеток, напоминающих сетчатку глаза человека. Разработка поможет в изучении врожденного амавроза Лебера (ВАЛ). Результаты исследования описаны в статье, опубликованной в журнале Stem Cell Reports.
Врожденный амавроз Лебера (ВАЛ) — наследственное заболевание сетчатки, которое приводит к серьезному ухудшению зрения с младенчества. Его вызывают мутации в генах, которые отвечают за выработку белков, необходимых для функционирования и выживания клеток сетчатки.
Вызывать ВАЛ могут мутации в более чем 20 различных генах, и в каждом из них происходят сотни изменений — генетических вариантов, некоторые из которых являются доброкачественными и не влияют на функции организма, тогда как другие вызывают дисфункцию или полную потерю зрения. Кроме того, в отношении некоторых из них — вариантов неопределенной значимости (VUS) — пока неизвестно, являются ли они доброкачественными или вызывают заболевание.
Авторы работы вырастили органоиды сетчатки из незрелых стволовых клеток, взятых у пациента с ВАЛ с известными патогенными вариантами гена RPGRIP1, и у другого пациента, который носил VUS в том же гене. Органоиды у обоих имели явные аномалии. Выявив «биомаркеры» RPGRIP1-ассоциированной ВАЛ в органоидах сетчатки, ученые вставили VUS RPGRIP1 в здоровые органоиды сетчатки. Оказалось, но в генетически модифицированных органоидах сетчатки также произошли изменения, подтверждающие, что VUS в гене RPGRIP1 действительно является патогенным. Кроме того, при повторном введении здорового гена RPGRIP1 в органоиды сетчатки, изменения, вызванные заболеванием, были обращены вспять.
Новую платформу можно использовать для классификации новых случаев VUS в RPGRIP1. В перспективе полученные знания помогут в разработке таргетной терапии для пациентов с врожденным амаврозом Лебера, а также в генетическом консультировании людей из групп риска.
